Исследование экспрессии гена в векторе TagRFP на примере белка CD4
Аннотация
В рамках данного исследования составлен аналитический обзор литературы в котором рассмотрены современные методы клонирования и исследования экспрессии генов, описана структура и функции белка CD4, способы его получения. Разработана рекомбинантная система экспрессии слитого белка CD4 c флуоресцентным белком TagRFP.
Разработаны две пары праймеров для амплификации первых двух доменов белка CD4, спроектированы праймеры модифицирующие нуклеотидную последовательность. Оптимизированы протоколы обратной транскрипции и секвенирующей реакции. Составлена блок-схема и произведен расчет материального баланса производства 1 кг биомассы CHO, содержащей слитый рекомбинантный белок CD4.
Within the framework of this study, an analytical review of the literature has been compiled, which examines modern methods of cloning and gene expression research, describes the structure and functions of the CD4 protein, and methods for its production. A recombinant expression system of fused CD4 protein with fluorescent TagRFP protein has been developed.
Two pairs of primers for amplification of the first two domains of the CD4 protein have been developed, primers modifying the nucleotide sequence have been designed. Reverse transcription and sequencing reaction protocols have been optimized. A block diagram was drawn up and the material balance of the production of 1 kg of CHO biomass containing fused recombinant CD4 protein was calculated.
Разработаны две пары праймеров для амплификации первых двух доменов белка CD4, спроектированы праймеры модифицирующие нуклеотидную последовательность. Оптимизированы протоколы обратной транскрипции и секвенирующей реакции. Составлена блок-схема и произведен расчет материального баланса производства 1 кг биомассы CHO, содержащей слитый рекомбинантный белок CD4.
Within the framework of this study, an analytical review of the literature has been compiled, which examines modern methods of cloning and gene expression research, describes the structure and functions of the CD4 protein, and methods for its production. A recombinant expression system of fused CD4 protein with fluorescent TagRFP protein has been developed.
Two pairs of primers for amplification of the first two domains of the CD4 protein have been developed, primers modifying the nucleotide sequence have been designed. Reverse transcription and sequencing reaction protocols have been optimized. A block diagram was drawn up and the material balance of the production of 1 kg of CHO biomass containing fused recombinant CD4 protein was calculated.