Разработка технологии создания клеточных сфероидов с помощью 3D печатной системы
Аннотация
Магистерская диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов и их обсуждения, выводов и списка литературы. Материалы работы изложены на 56 страницах. Работа содержит 2 таблицы, 28 рисунков. Список литературы включает 31 источник, из которых 11 русскоязычных и 20 англоязычных.
Ключевые слова: 3D - КУЛЬТУРА КЛЕТОК, КЛЕТОЧНЫЙ СФЕРОИД, АГАРОЗА, МОДЕЛИ IN VITRO, 3D - ПЕЧАТЬ
Объектом исследования является клеточная линия фибробластов.
Цель исследования: разработать метод культивирования клеток с образованием сфероидов, используя 3D печать. Для формирования и роста объемных клеточных сфероидов использовали субстрат с низкой адгезией – агароза. Для создания молдов с помощью 3D принтера были разработаны специальные штампы. Эффективность метода оценивали на примере клеточной линии фибробластов.
Проведенное исследование позволило подобрать оптимальную форму для штампа, а также подобрать микронасадку. Для образования клеточных сфероидов лучше всего подходит цилиндрическая микронасадка.
Проведен подбор оптимальных концентраций агарозы для чашек Петри и 96-луночных планшетов. В чашках Петри концентрация составила 2%, в 96-луночных планшетах были выбраны концентрации 1,5, 2 и 2,5%. Все концентрации показали себя хорошо при затвердевании, но при использовании концентрации 2,5% получается много пузырьков при раскапывании.
Выявлено, что размер ячеек микронасадки не существенно влияет на размер получаемых сфероидов. А также процесс фиксации сфероидов минимально влияет на их размер и форму.
Ключевые слова: 3D - КУЛЬТУРА КЛЕТОК, КЛЕТОЧНЫЙ СФЕРОИД, АГАРОЗА, МОДЕЛИ IN VITRO, 3D - ПЕЧАТЬ
Объектом исследования является клеточная линия фибробластов.
Цель исследования: разработать метод культивирования клеток с образованием сфероидов, используя 3D печать. Для формирования и роста объемных клеточных сфероидов использовали субстрат с низкой адгезией – агароза. Для создания молдов с помощью 3D принтера были разработаны специальные штампы. Эффективность метода оценивали на примере клеточной линии фибробластов.
Проведенное исследование позволило подобрать оптимальную форму для штампа, а также подобрать микронасадку. Для образования клеточных сфероидов лучше всего подходит цилиндрическая микронасадка.
Проведен подбор оптимальных концентраций агарозы для чашек Петри и 96-луночных планшетов. В чашках Петри концентрация составила 2%, в 96-луночных планшетах были выбраны концентрации 1,5, 2 и 2,5%. Все концентрации показали себя хорошо при затвердевании, но при использовании концентрации 2,5% получается много пузырьков при раскапывании.
Выявлено, что размер ячеек микронасадки не существенно влияет на размер получаемых сфероидов. А также процесс фиксации сфероидов минимально влияет на их размер и форму.