Оценка токсичности наночастиц оксида марганца (II, III) и оксида никеля (II) на культуре фибробластов человека

Прощенко Дарья Александровна

Аннотация


Оценка токсичности наночастиц оксида марганца (II, III) и оксида никеля (II) на культуре фибробластов человека.
Ключевые слова: культура фибробластов человека, наночастицы оксида марганца (II, III), наночастицы оксида никеля (II).
Объектом исследования является клеточная культура дермальных фибробластов человека, рассматриваемая как модель для исследования токсичности наночастиц.
Цель работы – исследование токсического действия наночастиц оксида марганца (II, III) и оксида никеля (II) на культуре фибробластов человека.
В исследовании оценивалась токсичность наночастиц оксида марганца (II, III) диаметром 32±10 нм и оксида никеля (II) - 30±12 нм. Наночастицы вносили в клеточную культуру на 9 сутки эксперимента в концентрациях 0,01, 0,05 и 0,1 мг/мл.
Для анализа возможного цитотоксического эффекта наночастиц использовался метод построения кривых роста. С помощью построения кривых роста культур после токсического воздействия в сравнении с культурой интактных фибробластов был выявлен дозозависимый токсический эффект наночастиц. Оценивалась жизнеспособность фибробластов с помощью трипанового синего. Было выявлено снижение жизнеспособности фибробластов после введения наночастиц. Наибольший токсический эффект проявили наночастицы оксида никеля (II) в концентрации 0,1 мг/мл.
С помощью МТТ-теста, определяющего изменение в митохондриальной активности клеток, было определено снижение жизнеспособности фибробластов после введения наночастиц. Использование резазурина для оценки токсичности показало дозозависимое снижение жизнеспособности фибробластов.
С помощью метода накопления нейтрального красного, который определяет повреждение лизосомальных мембран, было определено снижение жизнеспособности фибробластов после воздействия наночастиц. Причём степень повреждения лизосом после воздействия наночастиц оксида никеля была достоверно выше, чем после воздействия наночастиц оксида марганца. При использовании ЛДГ-теста было выявлено повреждающее действие наночастиц на клеточные мембраны. Морфологическое исследование культур позволило определить ускорение дифференциации фибробластического дифферона с последующей гибелью клеток.
В ходе исследования были получены результаты, свидетельствующие о дозозависимом цитотоксическом действии наночастиц, описаны предполагаемые механизмы их действия