Оценка морфологического и функционального состояния популяции моноцитов/макрофагов костного мозга интактных и стимулированных аминодигидрофталазиндионом натрия in vitro.
Аннотация
Моноциты и тканевые макрофаги являются основными клетками врожденного иммунитета, участвуют в запуске, реализации приобретенного иммунитета. Данные популяции клеток характерны тем, что являются гетерогенными группами.
Функции, которые реализует макрофаг зависят от его фенотипа, поэтому важно понимать, как данный тип клеток реагирует на лекарственные вещества, которые могут ока-зать влияние на его поляризацию. В данной работе использовалось иммуномодулирующее вещество – аминодигидрофталазиндион натрия (АДФН). В более ранних работах было по-казано, что данное химическое вещество в меньших концентрациях влияет на морфологию и функциональную активность культур тканеспецифичных макрофагов. Сейчас вызвало интерес рассмотреть влияние АДФН на моноцитарную линию клеток костного мозга, при увеличении его концентрации.
Целью данной работы являлось исследование морфологического и функционального состояния популяций макрофагов костного мозга в условиях культивирования с иммуномодулирующим веществом аминодигидрофталазиндионом натрия.
Исследование проводилось на культуре макрофагов и моноцитов КМ, выделенных из крыс породы Wistar (20 животных), возраст 3 месяца.
Для составления морфологической и морфометрической характеристики макро-фагов измерялись площадь клетки, площадь цитоплазмы, площадь ядер, ядерно-цитоплазматическое отношение. Для определения фенотипа макрофагов клетки окрашивали иммуноцитохимически на поверностно-клеточные маркеры CD F4/80 и CD163. Степень экспрессии CD F4/80 и CD163+ макрофагов оценивали по оптической плотности цитоплазмы. Пролиферативная активность клеток определялась с использованием маркера пролиферации Ki-67
В ходе работы выявлено, что АДФН не оказывает влияния на жизнеспособность клеточной культуры макрофагов/моноцитов костного мозга. АДФН усиливает экспрессию панмакрофагального F4/80, что свидетельствует о возрастании степени дифференциации макрофагов. В культурах, стимулированных макрофагов преобладает противовоспалительный фенотип CD163+ клеток. АДФН вызывает усиление экспрессии CD163+. Вещество из-меняет морфологию макрофагов в сторону образования дендритоподобных клеток, не влияя на основные морфометрические показатели (площадь клетки, цитоплазмы и ядерно-цитоплазматическое отношение). Количество Кi67+ клеток стимулированных и не стиму-лированных макрофагов костного мозга не меняется в зависимости от срока культивирования и дозы вводимого АДФН.
Функции, которые реализует макрофаг зависят от его фенотипа, поэтому важно понимать, как данный тип клеток реагирует на лекарственные вещества, которые могут ока-зать влияние на его поляризацию. В данной работе использовалось иммуномодулирующее вещество – аминодигидрофталазиндион натрия (АДФН). В более ранних работах было по-казано, что данное химическое вещество в меньших концентрациях влияет на морфологию и функциональную активность культур тканеспецифичных макрофагов. Сейчас вызвало интерес рассмотреть влияние АДФН на моноцитарную линию клеток костного мозга, при увеличении его концентрации.
Целью данной работы являлось исследование морфологического и функционального состояния популяций макрофагов костного мозга в условиях культивирования с иммуномодулирующим веществом аминодигидрофталазиндионом натрия.
Исследование проводилось на культуре макрофагов и моноцитов КМ, выделенных из крыс породы Wistar (20 животных), возраст 3 месяца.
Для составления морфологической и морфометрической характеристики макро-фагов измерялись площадь клетки, площадь цитоплазмы, площадь ядер, ядерно-цитоплазматическое отношение. Для определения фенотипа макрофагов клетки окрашивали иммуноцитохимически на поверностно-клеточные маркеры CD F4/80 и CD163. Степень экспрессии CD F4/80 и CD163+ макрофагов оценивали по оптической плотности цитоплазмы. Пролиферативная активность клеток определялась с использованием маркера пролиферации Ki-67
В ходе работы выявлено, что АДФН не оказывает влияния на жизнеспособность клеточной культуры макрофагов/моноцитов костного мозга. АДФН усиливает экспрессию панмакрофагального F4/80, что свидетельствует о возрастании степени дифференциации макрофагов. В культурах, стимулированных макрофагов преобладает противовоспалительный фенотип CD163+ клеток. АДФН вызывает усиление экспрессии CD163+. Вещество из-меняет морфологию макрофагов в сторону образования дендритоподобных клеток, не влияя на основные морфометрические показатели (площадь клетки, цитоплазмы и ядерно-цитоплазматическое отношение). Количество Кi67+ клеток стимулированных и не стиму-лированных макрофагов костного мозга не меняется в зависимости от срока культивирования и дозы вводимого АДФН.