Совместное определение аминокислот в биологических объектах
Аннотация
Данная работа посвящена определению аминокислот при их совместном присут-
ствии в пробе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Показано, что наиболее простым и экспрессным методом определения и разделения
смеси аминокислот является метод КЗЭ без предварительной дериватизации. В то же вре-
мя метод ВЭЖХ характеризуется большей точностью селективностью. Наиболее подхо-
дящим дериватизирующим агентом для чувствительного количественного определения и
селективного разделения аминокислот в смеси является фенилизотиоцианат, т.к. именно
этот реагент позволяет максимально быстро разделить наибольшее количество аналитов.
Установлено, что оптимальным режимом определения аминокислот методом ВЭЖХ
является градиентный режим элюирования с использованием раствора изопропанола
в ацетонитриле и двух ацетатных буферных растворов: с рН 4,0 и рН 5,5.
В выбранных условиях хроматографического анализа построены градуировочные
графики для определения 10 аминокислот (аспарагиновой кислоты, глутаминовой кисло-
ты, оксипролина, глицина, гистидина, аргинина, треонина, аланина, валина и фенилалани-
на). Графики линейны во всем исследованном диапазоне концентраций (1,5–75 мкг/см3).
ствии в пробе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Показано, что наиболее простым и экспрессным методом определения и разделения
смеси аминокислот является метод КЗЭ без предварительной дериватизации. В то же вре-
мя метод ВЭЖХ характеризуется большей точностью селективностью. Наиболее подхо-
дящим дериватизирующим агентом для чувствительного количественного определения и
селективного разделения аминокислот в смеси является фенилизотиоцианат, т.к. именно
этот реагент позволяет максимально быстро разделить наибольшее количество аналитов.
Установлено, что оптимальным режимом определения аминокислот методом ВЭЖХ
является градиентный режим элюирования с использованием раствора изопропанола
в ацетонитриле и двух ацетатных буферных растворов: с рН 4,0 и рН 5,5.
В выбранных условиях хроматографического анализа построены градуировочные
графики для определения 10 аминокислот (аспарагиновой кислоты, глутаминовой кисло-
ты, оксипролина, глицина, гистидина, аргинина, треонина, аланина, валина и фенилалани-
на). Графики линейны во всем исследованном диапазоне концентраций (1,5–75 мкг/см3).